默格高壓細胞破碎機破碎原理:
l 電機驅動
l 柱塞泵加壓
l 均質點破碎,産生空穴效應、剪切效應、撞擊效應
高壓破碎的要點:
l 壓力:均質機的壓力越高,空隙效應越大,破碎率越高。默格的機器壓力達1500bar。
l 閥結構:默格專業的破碎閥結構,細胞沖擊的速度遠遠高于其它均質機,撞擊後破碎效率非常高。
l 溫度控制:高壓破碎會大量産熱,默格專利的在位冷卻系統,将瞬間降低物料溫度。
适用案例:酶工程獸用/人用疫苗HPV疫苗融合蛋白核酸胰島素等
表達載體:動物細胞、大腸杆菌、芽孢杆菌、酵母菌、嗜熱杆菌等
工藝流程:通過菌種轉基因的方式表達蛋白或核酸等物質,經過破碎細胞壁,離心純化的手段得到最終的産品,一般工藝流程為:DNA轉接→菌種培養→獲得濕菌體→緩沖液重懸→破碎細胞壁→離心→純化
典型應用1:革蘭氏陰性短杆菌
發酵後,離心得到菌體
按15%~20%的菌體濃度,加入磷酸鹽緩沖溶液。
開冷水機,将整機的溫度降低。
加入物料,加壓到800~1000bar的壓力,破碎後的物料從出料管收集。
如果破碎率不夠,做第二次破壁
典型應用2:酵母菌
酵母菌和黴菌是真核生物,細胞壁成分是纖維素。
需要1200bar以上的壓力。
一般需要使用破碎閥,并均質2~3遍。
溫度控制非常重要
設備的穩定性和閥的壽命比較重要